بیان استرپتودورناز نوترکیب در باکتری اشریشیا کلی

Authors

محمود کمانی

mahmoud kamani arak medical universityدانشگاه علوم پزشکی اراک حمید ابطحی

hamid abtahi arak medical universityاراک دانشگاه علوم پزشکی دانشکده پزشکی قاسم مسیبی

ghasem mosayebi arak medical universityاراک دانشگاه علوم پزشکی دانشکده پزشکی راضیه نظری

razieh nazari department of microbiology, school of medicine, islamic azad university qom, qom, iranدانشگاه آزاد اسلامی قم مسعوده کریمی

abstract

زمینه و هدف: در عفونت های چرکی پوستی، غلظت چرک در ارتباط با دزاکسی ریبو نوکلئوپروتئین هاست.استفاده از استرپتودورناز که یک دزاکسی ریبونوکلئاز است به همراه استرپتوکیناز به حل شدن ترشحات کمک می‎کند، در نتیجه ترمیم زخم در اثر خارج شدن چرک از بافت نکروز شده صورت می‎گیرد. هدف از این مطالعه تولید استرپتودورناز نوترکیب از سوش استرپتوکوک گروه a که از نظر تولید استرپتودورناز پر بازده است، توسط وکتور بیانی می‎باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه بنیادی- کاربردی، dna ژنومی ژن استرپتودورناز با روش فنل- کلروفرم استخراج گردید، سپس با کمک پرایمرهای اختصاصی ویژه ژن استرپتودورناز، ژن مورد نظر با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر شد. ژن استرپتودورناز به دست آمده در ناقل پلاسمیدی sd1t4pgex جهت بیان کلون شد و پلاسمید sd1t4pgex وارد باکتری اشریشیاکلی سویه بی ال 21 گردید. تولید پروتئین با القا توسط ایزوپروپیل تیوگالاکتوپیرانوزید و بهینه سازی شرایط صورت گرفت. پروتئین نوترکیب با استفاده از کیت گلوتاتیون سفاروز 4 ب خالص گردید. یافته ها: ترادف نوکلئوتیدی محصول ژن واکنش زنجیره ای پلی مراز با ژن استرپتودورناز استرپتوکوک گروه a کاملاً یکسان بود. تولید پروتئین نوترکیب استرپتودورناز با القاء پلاسمید sd1t4pgex توسط تیوگالاکتو پیرانوزید انجام گردید. تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی و با استفاده از کیت گلوتاتیون سفاروز 4 ب انجام شد. سرم موش واجد آنتی استرپتودورناز در روش وسترن بلات با پروتئین تولید شده واکنش داد. نتیجه گیری: تولیداسترپتودورناز نوترکیب با استفاده از ناقلین پلاسمیدی نظیر pgex در میزبان اشریشیاکلی نیز امکان پذیر است. پروتئین تولید شده خاصیت آنتی ژنیک خود را به خوبی حفظ می‎کند. با توجه به نیاز داخلی کشور و همچنین بازدهی کم تولید و بیماری زا بودن استرپتوکوک ها تولید این محصول به صورت نوترکیب امکان پذیر است.

Upgrade to premium to download articles

Already have an account?login

similar resources

تاثیر غلظت های مختلف IPTG در القا بیان ژن اینترفرون بتا 1بی در اشریشیا کلی نوترکیب

full text

کلون‌سازی و بیان سیتوپلاسمی L-آسپاراژیناز II در باکتری اشریشیا کلی

سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ II) با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می‌گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (ALL) مورد استفاده قرار می‌گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاسمی آنزیم ال- آسپاراژیناز II و کلون‌سازی ژن آن بدون سیگنال پپتید و حذف متیونین ابتدایی بود. موا...

full text

کلون‌سازی و بیان سیتوپلاسمی L-آسپاراژیناز II در باکتری اشریشیا کلی

full text

بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی سویه (DE3) BL21

سابقه وهدف: آلبومین سرم انسان از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد . این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها ومتابولیت ها در بدن بوده و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد. چون تهیه آن از پلاسمای خون پرهزینه بوده و همراه با آلودگی به پاتوژن ها ی مختلف است، تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری به نظر می رسد مواد و روش ها: ژن آلبومین سرم انسان ( HSA ) براساس توالی موجود در...

full text

کلونینگ و بیان ژن drRRA باکتری داینوکوکوس رادیودورانس در اشریشیا کلی سویه Origami

سابقه و هدف: داینوکوکوس رادیودورانس یکی از باکتری‌های مقاوم به پرتو است و می‌تواند در محیط‌های رادیو اکتیو که سایر موجودات قادر به رشد در آن نیستند، به حیات خود ادامه دهد. مطالعات نشان می‌دهد که چندین پروتئین آنتی اکسیدان و ترمیم کننده DNA در مقاومت بخشی آن نسبت به پرتو نقش دارند. پروتئین DrRRA یکی از پروتئین‌های تنظیمی مهم داینوکوکوس رادیودورانس در مقاومت بخشی به پرتو است. هدف از این مطالعه ک...

full text

ایجاد سازواره ژنی گلوکاناز باکتری باسیلوس سوبتیلیس در اشریشیا کلی

سابقه و هدف: غلات به عنوان تغذیه اصلی طیور مطرح می باشد. غلات دارای میزان قابل توجهی پلی‌ساکارید غیرنشاسته‌ای (NSP) محلول می‌باشند. NSP منجر به افزایش اثرات منفی و ناسازگاری در طیور می‌شوند. مکمل آنزیمی بتاگلوکاناز با تجزیه‌ پلی‌ساکاریدهای غیرنشاسته‌ای ویسکوزیته محتویات هضمی دستگاه گوارش را کاهش می‌دهد و جذب روده‌ای را بالا می‌برد. این مطالعه با هدف ایجاد سازواره‌ ژنی گلوکاناز ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}

Journal title:

مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک

جلد ۱۴، شماره ۱، صفحات ۹۶-۱۱۳

Keywords

استرپتوکک گروه a استرپتودورناز بیان ژن

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com